4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS: 200422-18-0

Buaidh: Is e substrate a th’ ann an ONPG a thathas a’ cleachdadh gu sònraichte gus làthaireachd agus gnìomhachd an enzyme β-galactosidase a lorg.Nuair a tha enzyme β-galactosidase an làthair agus gnìomhach, bidh e a’ ceangal ONPG ann an dà thoradh: o-nitrophenol agus derivative galactose.Mar thoradh air saoradh o-nitrophenol bidh atharrachadh dath buidhe, a dh'fhaodar a thomhas le bhith a 'cleachdadh speactrophotometer.

Iarrtas: Tha grunn thagraidhean aig ONPG ann am bith-eòlas moileciuil agus rannsachadh bith-cheimigeachd:

Co-dhùnadh gnìomhachd β-galactosidase: Tha ONPG air a chleachdadh gu cumanta gus gnìomhachd enzyme β-galactosidase a thomhas agus a thomhas.Faodar an ìre de chruthachadh o-nitrophenol, a tha dìreach co-rèireach ri gnìomhachd an enzyme, a thomhas gu spectrophotometrically.

Beothachadh gine agus riaghladh: Bidh ONPG gu tric air a chleachdadh ann an deuchainnean co-cheangailte ri abairt gine agus sgrùdaidhean riaghlaidh.Tha e air a chleachdadh gu tric ann am measaidhean pròtain fusion, leithid an siostam fusion lacZ a thathas a’ cleachdadh gu cumanta, gus sgrùdadh a dhèanamh air abairt ghinean fo smachd luchd-adhartachaidh sònraichte.Tha an gnìomhachd beta-galactosidase air a thomhas a’ cleachdadh ONPG a’ toirt sealladh dhuinn air ìre faireachdainn gine.

Sgrionadh airson gnìomhachd β-galactosidase: Faodar ONPG a chleachdadh mar dhòigh sgrìonaidh colorimetric ann an teicneòlas DNA ath-leasaichte gus làthaireachd agus gnìomhachd gine LacZ a chomharrachadh, a tha a’ còdachadh β-galactosidase.Bidh an dòigh sgrìonaidh seo a’ cuideachadh le bhith ag aithneachadh clones anns a bheil gine ùidh.

Sgrùdaidhean kinetics einsím: Tha ONPG cuideachd feumail ann a bhith a’ sgrùdadh cinneas enzyme β-galactosidase.Le bhith a’ tomhas ìre ath-bhualadh enzyme-substrate aig diofar cho-chruinneachaidhean substrate, tha e comasach paramadairean cinneachail leithid seasmhachd Michaelis-Menten (Km) agus ìrean freagairt as àirde (Vmax) a dhearbhadh.