4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS: 200422-18-0

Buaidh: 'S e fo-strat a th' ann an ONPG a thathar a' cleachdadh gu sònraichte airson làthaireachd agus gnìomhachd an einnsein β-galactosidase a lorg. Nuair a bhios einnsein β-galactosidase an làthair agus gnìomhach, bidh e a' sgoltadh ONPG ann an dà thoradh: o-nitrophenol agus tùs galactose. Bidh saoradh o-nitrophenol ag adhbhrachadh atharrachadh dath buidhe, agus faodar seo a thomhas le bhith a' cleachdadh speactrofotomeatair.

Cleachdadh: Tha grunn chleachdaidhean aig ONPG ann am bith-eòlas moileciuil agus rannsachadh bith-cheimigeachd:

Co-dhùnadh gnìomhachd β-galactosidase: Bithear a’ cleachdadh ONPG gu cumanta gus gnìomhachd einnsein β-galactosidase a thomhas agus a thomhas. Faodar an ìre aig a bheil o-nitrophenol air a chruthachadh, a tha dìreach co-rèireach ri gnìomhachd an einnsein, a thomhas gu speactrofotomeatrach.

Abairteachadh agus riaghladh gine: Bithear tric a’ cleachdadh ONPG ann an deuchainnean co-cheangailte ri sgrùdaidhean air abairteachadh agus riaghladh gine. Bithear ga chleachdadh gu tric ann an deuchainnean pròtain co-aonaichte, leithid an siostam co-aonaichte lacZ a thathas a’ cleachdadh gu cumanta, gus sgrùdadh a dhèanamh air abairteachadh ginean fo smachd luchd-adhartachaidh sònraichte. Tha gnìomhachd beta-galactosidase a chaidh a thomhas le bhith a’ cleachdadh ONPG a’ toirt sealladh air ìre abairteachadh gine.

Sgrìonadh airson gnìomhachd β-galactosidase: Faodar ONPG a chleachdadh mar dhòigh sgrìonaidh dath-mheudrach ann an teicneòlas DNA ath-chuingealaichte gus làthaireachd agus gnìomhachd a’ ghine LacZ a chomharrachadh, a bhios a’ còdachadh β-galactosidase. Bidh an dòigh sgrìonaidh seo a’ cuideachadh le bhith a’ comharrachadh clònan anns a bheil a’ ghine air a bheil ùidh.

Sgrùdaidhean cineataigeach einnsein: Tha ONPG feumail cuideachd ann a bhith a’ sgrùdadh cineataigeach einnsein β-galactosidase. Le bhith a’ tomhas ìre ath-bhualadh einnsein-substrate aig diofar dùmhlachdan substrate, tha e comasach paramadairean cineataigeach leithid cunbhalachdan Michaelis-Menten (Km) agus ìrean ath-bhualadh as àirde (Vmax) a dhearbhadh.